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體內細胞培養及操作步驟1、瘤細胞懸液接種(1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數生長期培養瘤細胞。(2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液。(3)培養細胞應用PBS洗兩遍。(4)計數并調整細胞濃度至107~108/ml。(5)常規消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數盡可能多一些。(6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種...
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GEMINI胎牛血清貨號:900-108美國GeminiBio是被FDA認可的提供細胞培養用的生物產品和化學試劑的公司,產品包括人和動物的血清和其它用于細胞培養的相關產品,細胞因子重組蛋白等。Gemini公司,成立于1985年,位于加利福尼亞南部Calabasas市,1999年,遷至加利福尼亞北部Woodland市。Gemini公司在銷售的動物血清產品,全部來自于澳洲的子公司,血源主要為澳大利亞、新西蘭、巴拿馬、烏拉圭、巴西和阿根廷等。Gemini始終以“為客戶提供高質量產品...
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WinSera無外泌體血清的常見問題?能不能用無血清培液養,能不能用正常培液養到70%換無外泌體血清的培液?有些paper確實會使用無血清培養液培養細胞然后收上清分離外泌體,論壇中也有已經發表文章的朋友使用該方法,該方法是使用含有外泌體的血清培養細胞到一定密度,然后吸去培液,PBS洗數次之后換無血清培液進行培養即可。但是目前很多高檔次的paper基本都是使用含無外泌體血清的培液進行細胞培養的,無外泌體血清可以按照之前hzangs的推文介紹的方法制備。如果你的無外泌體血清比較珍...
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怎么做好微生物污染的預防?微生物污染在細胞培養中是非常常見的,也是令人頭大的一件事情。所以我們一定要將問題扼殺于搖籃之中,規范實驗中的各個步驟,確保細胞“寶寶”在無污染的情況下健康成長。1.實驗進行前,準備好所需的試劑和器材。玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140℃2小時以上。2.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養基5-10ml置培養箱內培養2-3天,肉眼見無渾濁...
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細胞凋亡是程序性細胞死亡的最佳表征形式,不會引起炎癥反應,對器官發育、組織重塑、免疫反應和腫瘤抑制至關重要。研究表明細胞凋亡有兩種主要途徑:內在或線粒體途徑、外在或死亡受體途徑。內在或線粒體途徑是通過內在途徑的細胞凋亡,可由任何引起氧化應激、線粒體紊亂和DNA損傷的刺激物觸發,例如癌癥治療劑、缺氧、缺血再灌注損傷和電離輻射。線粒體損傷可導致線粒體外膜透化,促進細胞色素釋放到細胞質中,釋放的細胞色素然后結合Apaf-1,從而通過激活procaspase9并形成稱為“凋亡體”的復...
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黑色素瘤中腫瘤細胞和CD8+T細胞的互作異質性導致了不同患者免疫治療臨床獲益的巨大差異。先前研究揭示出腫瘤微環境細胞的空間分布和功能狀態具有高度異質性。而黑色素瘤中,腫瘤細胞和CD8+T細胞之間是否存在串擾傾向,以及這種串擾傾向如何影響患者的臨床預后尚不清楚。本研究利用公開的單細胞轉錄組數據,在黑色素瘤中發現了腫瘤細胞和CD8+T細胞的異質性功能狀態和他們之間廣泛的配體-受體互作。此外,基于細胞間通信強度和細胞狀態活性之間的關聯,作者確定了腫瘤中間狀態和CD8+T細胞耗竭狀態...
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市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,使人難以分辨真偽及品質。好不容易在眾多品牌中挑選出誠心如意的產品后,那我們就可以安心使用了嘛?不盡然,我們匯總小伙伴經常咨詢的一些問題。1、為何上次購買的同一貨號的血清培養細胞狀態差異那么大?如何避免此影響?答:因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,每個批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細胞的影響,建議先進行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時,在-20℃下可保存5年)。如需...
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