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產品名稱:人乳腺癌阿霉素耐藥細胞(MCF-7/Adr)細胞特性1)來源:乳腺癌2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長3)含量:1x106細胞數4)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝5)用途:僅供科研使用。運輸和保存:干冰運輸及復蘇好存活細胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。細胞接收后的處理:...
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1細胞的復蘇【概述】復蘇細胞要求快速融化的手段,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化。避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損害?!居闷贰颗囵B液、吸管、離心管、培養瓶【步驟】[1]打開水浴鍋,將溫度調至37℃;[2]從液氮中取出凍存的細胞株,用鑷子夾住凍存管(戴防護面罩),迅速置入37℃的水浴鍋中,不斷振搖凍存管,使之盡快融化,要在1-2min內完成復溫;[3]*融化后,取出凍存管,移至超凈工作臺,用75%酒精擦洗消毒,用無菌吸管吸取細胞懸液移至無菌離...
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目前,流式細胞術廣泛應用于細胞表面和細胞內分子表達特征的分析,界定不同種類的細胞群,測定分離出的亞類純度,分析細胞的大小和總量,它可以同時分析單個細胞的多個參數。它主要用于檢測標記在抗體上的熒光強度,這些熒光抗體則可以檢測與特定細胞分子結合的蛋白或配體,如與DNA結合的溴化丙啶(PI)等。染色步驟包括:將培養的細胞或組織樣品制成單細胞懸液,然后將細胞放入管子或酶標板中與熒光標記或未標記的抗體孵育。之后將細胞放入流式細胞儀中進行分析。懸浮緩沖液中染色的細胞樣品通過流式細胞儀時,...
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對于流式檢測最初的一步就是選擇何種方法,通常是何種熒光物質標記的抗體。廠家根據需要開發了各種熒光標記的抗體,進行選擇時首先要滿足的就是所選擇的抗體必須在流式上能夠檢測,各單位買的流式儀功能不*一致,首先要和檢測方進行聯系,看能否檢測。在附表里我將常用的熒光標記物質的激發波長和檢測波長給出,可以參考。有幾個原則一起說一下:1、流式檢測時*熒光物質直接標記的抗體,如果沒有直接標記的抗體,用間接發,即二抗上標記熒光分子同樣可以。不過這增加了處理的難度,處理步驟增多,往往會不同程度影...
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免疫熒光單標記和雙標記的方法1.免疫熒光單標記方法免疫熒光單標記是指只標記一種蛋白質分子,方法比較簡單,只要按照染色步驟去做,通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇,固定液選擇的合適與否,可能會直接影響染色結果。具體染色方法如下。1)所需材料與試劑(1)培養在蓋玻片或玻璃培養皿中融合程度達到60%一70%的細胞。(2)一抗、FITC或TRITC標記的二抗。(3)4%多聚甲醛固定液或冷丙酮固定液(一20℃預冷20min)。(4)封閉液。(5)0.01mol/LPBS緩沖液。...
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目前已知的體外建立耐藥細胞株的方法主要有以下幾種:大劑量藥物沖擊法、藥物濃度遞增法、藥物濃度遞增與大劑量藥物沖擊相結合法、轉基因結合藥物篩選法。其中藥物濃度遞增法和大劑量藥物沖擊法成為臨床建立腫瘤細胞化療耐藥模型的常用方法。①藥物濃度遞增法是指最初使用低濃度的藥物刺激細胞,等待細胞適應低濃度的環境之后,再略微提高藥物濃度,繼續等待細胞適應目前的環境,經過反復的培養和加壓,最終使細胞可以在高濃度的藥物環境下生存②大劑量藥物沖擊法是在細胞培養時加入超高藥物濃度的藥物,但是孵育的時...
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實驗室培養的細胞種類可以大致分為貼壁細胞和懸浮細胞兩種,只有極少數類型細胞同時存在兩種狀態。懸浮細胞是指不需要依賴支持物,可在培養基中以懸浮狀態生長的一類細胞,如淋巴細胞和大部分血液系統來源細胞。(如小鼠白血病細胞WEHI-3,人白血病細胞K-562,HL-60)。工業上也有越來越多的貼壁傳代細胞被馴化出來,進行全懸浮的培養。目前在工業中應用的主要有SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293細胞等,它們主要用于重組蛋白質生產;在獸用生物制品中常用的傳代細胞主要有采用全懸...
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