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關(guān)于WinSera血清熱滅活問題1.為何會有熱滅活血清呢?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體系統(tǒng)參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中,培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。2.血清熱滅活是否必要?血清熱滅活的步驟在1970年代就已建立,至今成為很多實驗室的常規(guī)血清前處理步驟;但許多先前認為必須熱滅活的原因,卻早已經(jīng)不再成立:去除支原體污染?早期血清加工使用的450nm濾膜,早已被100nm濾膜取代...
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※正確解凍首先,應(yīng)按照逐步解凍的方式正確解凍血清:從-20℃取出后,置于4℃冰箱緩慢解凍,最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或37℃水浴解凍,則非常容易產(chǎn)生沉淀。在解凍過程中,請注意,應(yīng)時不時緩慢搖晃血清瓶,可減少沉淀的產(chǎn)生。為避免反復凍融,建議您將血清分裝使用。使用和保存注意事項WinSera胎牛血清沉淀很難預測和避免,出現(xiàn)沉淀后也無需擔憂,這并不會影響血清的品質(zhì)。已知血清沉淀在以下條件下會有增多的可能:1)熱滅活;2)37℃培養(yǎng);3)反復凍融;4)伽馬射線照...
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WinSera血清沉淀是什么?1.血清沉淀是什么?血清中經(jīng)常會出現(xiàn)肉眼可見的沉淀,其成分有多種類型,產(chǎn)生的原因有很多。主要有纖維蛋白(絮狀沉淀)、甲胎蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻粘連蛋白、磷酸鈣(顯微鏡下小黑點沉淀)、膽固醇等。纖維蛋白(Fibrin)血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產(chǎn)過程中,血清采集、過濾(3次0.1μm過濾)和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成,此時血清中纖維蛋白原(Fibrinogen)處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后,血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝...
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WinSera胎牛血清中絮狀沉淀是什么?怎么處理?●是什么胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。●...
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WinSera血清中的“黑膠蟲”是怎么回事?在細胞培養(yǎng)的時候,有時會在400倍顯微鏡下看到小黑點在動,小黑點有時呈點狀,有時呈小的片狀,運動形式為在原地振動,類似布朗運動,這種小黑點既不是細菌、霉菌,也不是支原體,目前業(yè)內(nèi)人士稱其為“黑膠蟲”。黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭議。黑膠蟲一般是存在血清里的,而血清通常是經(jīng)過0.1μm濾膜過濾的,所以血清里不可能存在細菌、霉菌及支原體等微生物。如果說黑膠蟲不是生物,它會不斷增多,達到一定數(shù)量時會與細胞競爭性生長,與細胞...
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WinSera胎牛血清絮狀物如何處理?若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該怎么處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普通的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可...
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WinSera胎牛血清如何儲存和解凍血清如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。*溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋...
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細胞污染防治方法1.細菌污染細菌污染是細胞培養(yǎng)中最常見的污染,主要由操作不慎或使用了滅菌不*的耗材與試劑引入。最常見的有枯草桿菌、大腸桿菌、假單胞菌及白色葡萄球菌。鏡下形態(tài)則為長桿狀、短桿狀和顆粒狀等。左邊的就是比較典型的桿菌污染,一般桿菌會延軸向快速游動,量少時培養(yǎng)基澄清。右圖是顆粒狀污染,一般培養(yǎng)基會渾濁或有白色沙狀沉淀。好氧菌增殖分裂迅速,感染24h內(nèi)即可使培養(yǎng)基渾濁;厭氧菌在常規(guī)細胞培養(yǎng)條件下增殖緩慢,需要較長時間才會觀察到渾濁現(xiàn)象。污染處理:由于國內(nèi)細胞培養(yǎng)中抗生素...
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