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腎小球分離、移植培養SD大鼠頸椎脫臼法處死,75%乙醇浸泡1~2分鐘,2次,置超凈臺內,打開腹腔取出腎臟剪碎,置含Hank's液的無菌培養皿洗滌,置80目不銹鋼篩網上。用扁平自制小鏟輕輕碾磨產物微小組織透過篩網,濾過組織Hank's液混合物用吸管吸至120目不銹鋼篩網,濾過,去小組織塊,濾過物吸至200目不銹鋼篩網,輕輕濾過,Hank's液洗滌次,收集網上腎小球,鏡下觀察為分離良好的腎小球。腎小球用0.2%胰酶、0.1%膠原酶,37℃消化20分鐘,加血清終止胰酶反應,離心除去...
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一般在拿到細胞后,應該注意什么?收到細胞后先不要開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議對收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況一般可以再申請免費發送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培...
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簡單好用以及精確的細胞培養的原理和步驟今天我們要講解的是,細胞培養的原理和步驟,簡單好用以及精確,學完之后,相信你對細胞培養將不再陌生。接下來就開始今天的學習吧!細胞培養:體外模擬體內需要的生長條件(溫度,營養等),然后加上一些處理條件,比如做藥物篩選,就可以做抗性基因的表達的篩選,比如還可以測定某個基因敲低或是過表達的產物,這個當然要結合WB來看最后基因的表達產物是否升高哦,細胞培養的應用還有很多。細胞培養的基本原理:細胞傳代(生存空間和營養不足,長得太密,代謝廢物太多,要...
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細胞培養常見問題匯總新買或惠贈的細胞1.新買的或惠贈的細胞如何處理?不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手應趕緊做這幾件事:檢測瓶子是否破裂;培養基是否漏出,是否渾濁;是否有支原體污染;迅速擴增凍存。2.能否使用與原先培養條件不同的培養基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基,若驟然使用和原先提供培養條件不同的培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。3.購買的細胞死亡或存活率不佳可能原因?常見原因可能有:培養基使用錯誤或培養基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品...
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那么,透析胎牛血清具體適用于實驗中有哪些常見場景?我們來詳細講講。一、實驗過程中需要標記氨基酸使用放射性標記小分子,對生物合成過程進行監測,以研究蛋白質等大分子的生化性質、合成、加工、細胞內傳送、分泌和降解過程。這時,常將細胞放在含有充足養分和放射性標記氨基酸(如35S標記的蛋氨酸或半胱氨酸)的培養液中進行標記。為避免外源未標記的氨基酸的干擾,這時所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基礎培養基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。這種方法常見于生化代謝調控與疾病的機理研究...
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無外泌體胎牛血清(Exo-FBS)英文名稱:ExosomedepletedFetalBovineSerum品牌:winsera貨號:規格:50mL/瓶貯存:-20℃說明:該產品僅供科研使用胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是大多數細胞培養重要的生長支持物。天然來源的FBS會含有大量的外泌體(exosome)等囊泡(ExtracellularVesicles)成分。由于FBS來源的外泌體會對研究結果產生巨大干擾,因此,外泌體研究時必須使用去除外泌體后的FBS進...
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哪些原因容易導致PAN胎牛血清沉淀:1.溫度改變太大,血清由-20℃直接放入37℃解凍,因溫度改變劇烈容易導致沉淀。2.血清在室溫或4℃冰箱放置時間太久,血清中的不穩定成分會被破壞,影響細胞生長效果;導致血清品質變差,也會產生沉淀。3.血清分裝凍存時,注意在不產生氣泡的情況下搖晃均勻,避免因血清成分濃度改變產生沉淀。4.血清滅活后容易產生沉淀,如需使用滅活血清,請按56℃,30分鐘,輕微搖晃原則操作,滅活溫度過高、時間過長、搖晃不均都容易產生沉淀。5.如有血清沉淀,分裝后進行...
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